Исследование на петрифильмах (3M™ Petrifilm™) – новый формат готовых питательных сред (тест-пластины или среды на подложке) – лишено перечисленных недостатков и позволяет проводить ускоренный анализ (экспрессное определение микробиологических показателей). Петрифильмы рекомендованы Роспотребнадзором РФ для применения в производственных лабораториях, контролирующих продовольственное сырье и пищевые продукты, а также в испытательных лабораториях Роспотребнадзора и Россельхознадзора, сертификационных центрах и других организациях, аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований (микробиологического контроля).
Петрифильмы (тест-пластины) широко используется за рубежом, в том числе и для анализа пищевых продуктов. Петрифильмы сертифицированы авторитетными международными организациями (AOAC, AFNOR, NordVal). Применение петрифильмов обеспечит существенное (в 1,5-2 раза) снижение прямых затрат на проведение анализов, позволит сократить продолжительность исследования и исключить обязательный контроль качества питательных сред.
Принцип действия
Петрифильмы – это тест-пластины с питательной средой на подложке (среды на подложке), предназначенные для количественного определения различных групп микроорганизмов (производитель - компания 3M, США). Петрифильм имеет мультислойную структуру. Он состоит из подложки со средой и покрывающей прозрачной пленки, сохраняющей стерильность. Среды содержат хромогенные субстраты и индикаторы, окрашивающие колонии микроорганизмов в характерный цвет. Питательная среда петрифильма доступна микроорганизмам только после добавления образца; без гидратации тест-пластины не активны. После посева под действием воды образца на подложке петрифильма образуется гель. По окончании инкубирования подсчитываются выросшие на петрифильме колонии.
В соответствии со стандартом ИСО 11133 каждая микробиологическая лаборатория, использующая питательные среды, обязана контролировать их качество. Однако при использовании петрифильмов микробиолог освобожден от этой трудоемкой процедуры, так как тест-пластина - аналог готовой питательной среды, качество которой контролирует компания-производитель.
Петрифильм можно использовать в течение 2 лет при хранении в стандартной упаковке в холодильнике (при температуре ≤8С), тогда как срок хранения готовых питательных сред в чашках Петри не превышает 3 месяцев.
Микроорганизмы, определяемые на петрифильмах при анализе пищевых продуктов, сырья, объектов внешней среды
Микроорганизмы
|
Тип петрифильма
|
Время инкубации, ч
|
КМАФАнМ
|
3M™ Petrifilm™ «Petrifilm Aerobic Count Plate» (AC)
3Mтм Petrifilm RapidTM Aerobic Count Plate (RAC)
|
48
24
|
Дрожжи и плесени
|
3M™ Petrifilm™ «Yeast and Mould Count Plate» (YM)
|
72-120
|
БГКП
|
3M™ Petrifilm™ «Coliform Count Plate» (CC)
|
24
|
3M™ Petrifilm™ «E. coli / Coliform Count Plate» (EC)
|
24-48
|
3M™ Petrifilm™ «Series 2000 Rapid Coliform Count Plate» (RCC)
|
6-24
|
3M™ Petrifilm™ «High-Sensitivity Coliform Count Plate» (HSCC)
|
24
|
Escherichia coli
|
3M™ Petrifilm™ «Select E. coli Count Plate» (SEC)
3M™ Petrifilm™ «E. coli / Coliform Count Plate» (EC)
|
24
24-48
|
Бактерии семейства Enterobacteriaceae
|
3M™ Petrifilm™ «Enterobacteriaceae Count Plate» (EB)
|
24
|
Staphylococcus aureus
|
3M™ Petrifilm™ «Staph Express Count Plate + Staph Express Disk» (STX)
|
24
|
Листерии (Listeria spp.)
|
3M™ Petrifilm™ «Environmental Listeria Plate» (EL)
|
28
|
Молочнокислые бактерии (МКБ)
|
3M™ Petrifilm™ «Petrifilm Aerobic Count Plate» (AC) + MRS broth
|
48
|
Микроорганизмы, определяемые на петрифильмах при анализе напитков и бутилированной воды
Микроорганизмы
|
Тип петрифильма
|
Время инкубации, ч
|
Гетеротрофные микроорганизмы (ОМЧ)
|
3M™ Petrifilm™ «Aqua Heterotrophic Count Plate» (AQHC)
|
48
|
БГКП
|
3M™ Petrifilm™ «Aqua Coliform Count Plate» (AQCC)
|
24
|
Бактерии семейства Enterobacteriaceae
|
3M™ Petrifilm™ «Aqua Enterobacteriaceae Count Plate» (AQEB)
|
24
|
Дрожжи и плесени
|
3M™ Petrifilm™ «Aqua Yeast and Mould Count Plate» (AQYM)
|
72-120
|
Преимущества петрифильмов
- нет необходимости в приготовлении питательных сред, использование петрифильмов исключает случайные ошибки из-за разной квалификации персонала.
- пригодны для использования в течение продолжительного срока (до 2-х лет); сохраняют свои свойства при хранении в условиях отрицательных температур.
- анализ более достоверен (из-за отсутствия термического шока при контакте микроорганизмов с горячей средой) и лучше воспроизводится (благодаря равномерному распределению клеток при посеве);
- при анализе колиформных бактерий на петрифильмах важным идентификационным признаком служит образование в процессе ферментации лактозы пузырьков газа вокруг колоний; при росте этих бактерий на обычных агаризованных средах газообразование не проявляется и не учитывается;
- сокращается продолжительность анализа, например, при исследовании колиформных бактерий и E. coli ─ с 3-5 до 1-2 суток, поскольку идентификация этих бактерий завершается на этапе первичного посева, что исключает необходимость постановки дополнительных тестов;
- лучше защищают персонал от вредного микробного воздействия (что особенно важно при работе с плесневыми грибами): после посева тест запечатывается, зона роста микроорганизмов строго ограничивается, тем самым исключается контаминация помещения;
- споровая микрофлора не мешает подсчету выросших на петрифильме колоний микроорганизмов;
- занимают меньше места, компактны, их проще транспортировать, хранить, инкубировать и утилизировать: для обеззараживания пригодны автоклавы небольшого объема, при этом общий объем отходов микробиологического анализа как минимум в 10 раз меньше, по сравнению с классическим методом;
- автоматическая система регистрации и учета колоний бактерий с использованием Petrifilm Plate Reader обеспечивает их ускоренный подсчёт, что позволяет исключить случайные ошибки персонала и документировать результаты анализа.
Хранение петрифильмов
Хранить невскрытые упаковки петрифильмов при температуре ≤8°C. Использовать их до даты срока годности, указанной на упаковке. В местах с высокой влажностью, где возможно образование конденсата, желательно, перед вскрытием упаковки довести ее температуру до комнатной.
Для хранения открытой упаковки, завернуть край упаковочного пакета и заклеить его липкой лентой. Не хранить в холодильнике открытые упаковки. Использовать петрифильмы 3M Petrifilm Aqua (AQHC) в течение месяца после вскрытия упаковки.