Описание
Петрифильм 3М Petrifilm Aerobic Count Plate (АС) содержит готовую питательную среду, гель, растворимый в холодной воде, который застывает при комнатной температуре, тетразолиевый индикатор, который облегчает подсчет колоний на петрифильме. Петрифильмы 3М Petrifilm Aerobic Count Plate (АС) используются для подсчета мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов КМАФАнМ в образцах пищевых продуктов, продовольственном сырье. Петрифильмы также удобно использовать для мониторинга окружающей среды. Время исследования составляет 48-72 часа. Petrifilm Aerobic Count Plate Петрифильмы снижают трудозатраты и дают возможность проводить более частый мониторинг в критических контрольных точках на производстве, обеспечивая лучший контроль и более высокое качество выпускаемой продукции. 

Хранение и утилизация
Хранить невскрытые упаковки с петрифильмами следует в холодильнике при температуре 2-8°C. Перед открытием упаковки с петрифильмами следует подождать, чтобы  упаковка нагрелась до комнатной температуры. Неиспользованные петрифильмы поместить обратно в упаковку. Чтобы предотвратить контакт с влагой, не хранить открытые упаковки с петрифильмами в холодильнике. Хранить вновь запечатанные упаковки в сухом прохладном месте в течение не более одного месяца. Нахождение вскрытых упаковок петрифильмов при температуре более 25°C и/или относительной влажности свыше 50% может повлиять на их качество. Не использовать петрифильмы со следами обесцвечивания. Срок годности и номер партии указаны на каждой упаковке петрифильмов. Как и все системы для тестирования микроорганизмов, петрифильмы после использования могут содержать жизнеспособные бактерии. Следуйте стандартным методам инактивации и утилизации биологического материала. 

Подготовка образца
1. Для разбавления образца использовать 0,1% пептонную воду, забуференную петонную воду, физиологический раствор или дистиллированную воду. 
Не использовать буферные растворы, содержащие цитрат, бисульфит или тиосульфат, т.к. эти соединения могут ингибировать рост бактерий.
2. Смешать и гомогенизировать образец.
3. Для оптимального роста бактерий довести рН разведенного образца до 6,6–7,2. Для коррекции рН кислых образцов используйте 1 н. NaOH. pH щелочных образцов довести с помощью 1 н. HCl. 

Внесение образца
1. Поместить петрифильм Petrifilm Aerobic Plate Count (АС) на ровную поверхность.
2. Поднять верхнюю пленку и внести 1 мл разведенного образца на поверхность питательной подложки (в центр) петрифильма Petrifilm Aerobic Plate Count (АС).
3. Опустить верхнюю пленку на образец.
4. Сразу же поместить пластиковый распределитель в центр петрифильма выемкой вниз. Мягко надавить на центр, для распределения образца. Не перемещать и не крутить распределитель по пленке!
5. Убрать распределитель и оставить петрифильм на одну минуту для затвердевания геля. 

Инкубация
Инкубировать петрифильмы в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх. Петрифильмы можно группировать в количестве не более 20 штук. Инкубировать петрифильмы в течение (48-72) часов при (30 или 37±1)°C.

Интерпретация
1. Количество колоний на петрифильмах можно учесть автоматически с помощью Петрифильм-Ридера Petrifilm Plate Reader (PPR), стандартного счетчика колоний или другого подсвечиваемого увеличителя. Подсчитать количество красных колоний, независимо от их размера и интенсивности окраски. Зона роста составляет примерно 20 см². 

2. Можно проводить учет колоний на петрифильмах, если их численность превышает 300 колоний. В этом случае подсчитывают количество колоний в одном или более квадратах и определяют среднее количество колоний в квадрате. Умножив среднее количество колоний на 20, получают число колоний на петрифильме.

3. При большой концентрации колоний на петрифильме может происходить окрашивание всей зоны роста в красный или розовый цвет. Иногда в центре может вообще не оказаться видимых колоний, а по краям будет видно множество мелких колоний. В этом случае необходимо приготовить разведение образца для получения более точного результата.

4. Некоторые микроорганизмы могут разжижать гель, что затрудняет подсчет колоний. В этом случае следует учесть количество колоний на других, нормальных участках и пересчитать количество на всю площадь.

5. При необходимости колонии могут быть изолированы для дальнейшей идентификации. Для этого следует поднять верхнюю пленку и извлечь колонию из геля. Идентифицировать колонию с использованием стандартных методов.

6. По окончании инкубации петрифильмы можно хранить в морозильнике в течение одной недели при температуре (-15C°) для последующего учета. Проводится в тех случаях, когда нет возможности учесть численность сразу после инкубации.

3М Petrifilm Aerobic Count Plate (АС) – петрифильм для определения общего микробного числа представляет собой тест-пластину, которая содержит готовую питательную среду, водорастворимый в холодной воде гель (затвердевающий при комнатной температуре), индикатор для облегчения подсчета колоний. Петрифильмы используются для подсчета мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов КМАФАнМ.   КМАФАнМ = 152 Индикатор среды петрифильмов окрашивает колонии бактерий в красный цвет. Подсчитать количество красных колоний независимо от размера и интенсивности цвета.  3М Petrifilm Aerobic Count Plate (АС)   Рис.2  Количество = 0 На петрифильме легко учитывать колонии. На рис.2 показано отсутствие роста колоний.  Рис.3  Количество = 16 На Рис.3 показан рост нескольких бактериальных колоний на петрифильме (АС).   Рис.4  Количество = 143  Оптимально, если количество колоний на петрифильме находится в диапазоне от 25-250. См. Рис.4.  Рис.5.  Количество = 560  Если количество колоний превышает 250, как на рис.5, то можно приблизительно оценить количество колоний. Для этого подсчитывают среднее количество колоний в одном квадрате (1 см2) и умножают на 20, чтобы получить общее количество колоний на петрифильме. Зона роста на петрифильме (АС) составляет примерно 20 см2.  Слишком большое количество колоний для подсчета (для точного результата следует разбавить образец)   Рис. 6  Количество = слишком много колоний (Примерное количество = 103)  На Рис.6 пример слишком большого количества колоний для подсчета на петрифильме.  Рис.7. Количество = слишком много колоний (Примерное количество = 106)  В случае очень большого количества колоний цвет петрифильма в зоне роста может меняться на розовый Рис.7. Отдельные колонии могут быть видны только по краю зоны роста. Такой результат учитывается как слишком большое количество колоний для подсчета.   Рис.8. Количество = слишком много колоний (Примерное количество = 103)  Иногда происходит неравномерное распределение колоний как на Рис.8. Такой результат также учитывается как слишком большое количество колоний для подсчета.  Рис.9.  Количество = слишком много колоний  (Примерное количество = 107) Количество колоний на Рис.9, на первый взгляд, можно учесть. Однако при более внимательном просмотре можно заметить по краю зоны роста очень высокую концентрацию колоний. Такой результат учитывается как слишком большое количество колоний для подсчета.  Разжижжение геля и частицы продукта   Рис.10 Примерное количество колоний = 160  Некоторые виды бактерий разжижают гель на петрифильме (АС) Рис.10. В этом случае следует вычислить среднее значение колоний в нескольких квадратах (которые не были подвержены действию разжижжения) и результат умножить на 20 для получения количества колоний на петрифильме. Не учитывайте красные пятна в местах разжижжения геля.  Рис.11. Количество колоний = 83 Поскольку колонии на петрифильмах (АС) красные, то их можно отличить от темных неправильной формы частиц образца. Для уменьшения влияния частиц образца используйте пакеты с фильтром. Петрифильм КМАФАнМ – Petrifilm Aerobic Count Plate (АС)    Хранение Хранить закрытые упаковки петрифильмов при температуре ≤8оС. Использовать петрифильмы до даты, указанной на упаковке. В местах повышенной влажности, где может скапливаться конденсат, перед открытием упаковки следует дождаться, пока петрифильмы нагреются до комнатной температуры. Для закрытия вскрытой упаковки следует согнуть край и заклеить клейкой лентой. Храните повторно закрытые упаковки при температуре ≤25оС и влажности ≤50%. Не хранить вскрытые упаковки петрифильмов в холодильнике. После вскрытия упаковки использовать петрифильмы не более одного месяца.    Подготовка образцов Приготовить разведение 1:10 или большие разведения образца. Взвесить образец продукта в стерильном пакете, флаконе или другом стерильном контейнере. Добавить соответствующее количество разбавителя  • фосфатный буфер  • 0,1% пептонная вода  • пептонно-солевая вода (ИСО 6887)  • забуф. пептонная вода (ИСО 6579) • физ.раствор • раствор Рингера  Не использовать буферные р-ры, содержащие цитрат, бисульфит или тиосульфат, которые могут ингибировать рост Гомогенизировать образец с использованием гомогенизатора, например, Masticator.  рН разведенного образца должен быть в диапазоне 6,6-7,2. Использовать 1М NaOH или 1М HC    Инокуляция (внесение образца на петрифильм) Поместить петрифильм на ровную поверхность. Приподнять верхнюю пленку. Добавить пипеткой 1 мл образца в центр нижней пленки. Пипетку держать перпендикулярно. Отпустить пленку, дать пленке свободно упасть. Не прокатывать верхней пленкой вниз.   Поместить распределитель (выемкой вниз) на верхнюю пленку, накрывая образец. Мягко надавить на распределитель для равномерного распределения образца по кругу. Не следует крутить или скользить распределителем. Поднять распределитель. Подождать, как минимум, одну минуту для затвердевания геля.    Инкубация                             Учет результатов  Инкубировать петрифильмы прозрачной стороной вверх. Петрифильмы можно складывать в стопки до 20 штук. В термостат можно установить емкость с водой для предотвращения потерь влаги на петрифильмах. Инкубировать в течение 48-72 ч ± 3 часа при 30 или 37± 1оС. Колонии можно учесть автоматически с использованием считывающего устройства – Petrifilm Plate Reader (PPR) или с помощью счетчика колоний или увеличительного стекла. Колонии можно изолировать для дальнейшей идентификации. Приподнять верхнюю пленку и отобрать колонию из геля.