Описание
Петрифильм 3М Petrifilm Environmental Listeria (EL) Plate содержит готовую питательную среду, гель, растворимый в холодной воде, который застывает при комнатной температуре, хромогенный индикатор, который облегчает подсчет колоний на петрифильме. Петрифильмы 3М Petrifilm Environmental Listeria (EL) используются для подсчета листерий при мониторинге окружающей среды, исследовании смывов, а также для повышения эффективности проведения гигиенического контроля на предприятии. Петрифильм Petrifilm Environmental Listeria (EL) позволяет определять листерии, такие как Listeria monocytogenes, Listeria innocua, Listeria welshimeri. Наличие индикаторного вида листерий – L.innocua позволяет сделать заключение, что условия благоприятны для присутствия патогенной листерии - L.monocytogenes. Многие микроорганизмы в окружающей среде могут находиться в стрессовых условиях, например, из-за присутствия дезинфицирующих средств. В качестве восстановительного бульона для микроорганизмов, находящихся в состоянии стресса, используется забуференная пептонная вода. Использование забуференной пептонной воды позволяет восстановить стрессовые клетки листерий без изменения их численности.
Хранение и утилизация
Хранить невскрытые упаковки с петрифильмами следует в холодильнике при температуре 2-8°C. Перед открытием упаковки с петрифильмами следует подождать, чтобы упаковка нагрелась до комнатной температуры. Неиспользованные петрифильмы поместить обратно в упаковку. Чтобы предотвратить контакт с влагой, не хранить открытые упаковки с петрифильмами в холодильнике. Хранить вновь запечатанные упаковки в сухом прохладном месте в течение не более одного месяца. Нахождение вскрытых упаковок петрифильмов при температуре более 25°C и/или относительной влажности свыше 50% может повлиять на их качество. Не использовать петрифильмы со следами обесцвечивания. Срок годности и номер партии указаны на каждой упаковке петрифильмов.
Как и все системы для тестирования микроорганизмов, петрифильмы после использования могут содержать жизнеспособные бактерии. Следуйте стандартным методам инактивации и утилизации биологического материала.
Инструкция по использованию
Подготовка образца
1. Для исследования смывов с объектов внешней среды используйте стерильный тампон (или губку). В качестве увлажняющего агента можно использовать физиологический раствор или раствор Рингера.
2. В асептичных условиях добавить 5 мл нагретой до (20-30оС) стерильной забуференной пептонной воды (восстановительный бульон для стрессовых клеток листерий).
3. Перемешать и гомогенизировать образец с забуференной пептонной водой в течение 1 мин (можно использовать вортекс).
4. Выдержать образцы при комнатной температуре (20-30оС) в течение 1-1,5 часов.
5. Для оптимального роста бактерий рН образца должен быть в диапазоне 4–9.
Внесение образца
1) Поместить петрифильм Petrifilm Environmental Listeria (EL) на ровную поверхность.
2) Перед посевом перемешать образец.
3) Добавить 3 мл исследуемого образца.
4) Поднять верхнюю пленку петрифильма и внести 3 мл образца на поверхность питательной подложки (в центр) петрифильма Petrifilm Environmental Listeria (EL).
5) Опустить верхнюю пленку на образец (прокатывая), избегать захвата пузырьков.
6) Поместить пластиковый распределитель в центр петрифильма. Мягко надавить на центр, для распределения образца.
7) Убрать распределитель и оставить петрифильм на десять минут для затвердевания геля.
Инкубация
Инкубировать петрифильмы в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх. Петрифильмы можно группировать в стопки в количестве не более 10 штук. Инкубировать петрифильмы в течение (28±2) часов при (37±1)°C. Более продолжительная инкубация может привести к неоднозначным результатам.
Интерпретация
1) Количество колоний на петрифильмах можно учесть автоматически с помощью стандартного счетчика колоний или другого подсвечиваемого увеличителя. Зона роста составляет примерно 42 см2.
2) Для количественного учета подсчитать все красно-фиолетовые колонии. Не учитывать колонии, которые образуются на пенопластовом ограничителе, т.к. они не находятся в селективных условиях.
3) Если петрифильмы инкубировались минимальное время (26 часов) и колонии розового или/и серого цвета, то необходимо продлить время инкубации до 28 часов.
4) При очень большом количестве колоний на петрифильме колонии получаются мелкие розово-коричневого цвета. Слишком большое количество колоний для количественного учета.
5) При необходимости колонии могут быть изолированы для дальнейшей идентификации. Для этого следует поднять верхнюю пленку и извлечь колонию из геля. Идентифицировать колонию с использованием стандартных методов.
6) По окончании инкубации петрифильмы можно хранить в морозильнике в течение одной недели при температуре (-15C°) для последующего учета. Проводится в тех случаях, когда нет возможности учесть численность сразу после инкубации.