15.1.1. Выявление и определение общего микробного числа, количества  дрожжей и плесневых грибов, колиформных бактерий, Escherichia coli, бактерий семейства Enterobacteriaceae, стафилококков (S.aureus)

Используемые петрифильмы:

15.1.1.1. «3М™ Petrifilm™ Aerobic Count Plate (АС)» – для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ)

15.1.1.2. «3М™ Petrifilm™ Yeast and Mold Count Plate (YM)» – для определения количества дрожжей и плесневых грибов

15.1.1.3. «3М™ Petrifilm™ Coliform Count Plate (СС)» – для выявления и определения количества колиформных бактерий (БГКП)

15.1.1.4. «3М™ Petrifilm™ Select E.coli Count Plate (SEC)» – для выявления и определения количества Escherichia coli

15.1.1.5. «3М™ Petrifilm™ E.coli/Coliform Count (ЕС)» – для выявления и определения количества E.coli и колиформных бактерий (БГКП)

15.1.1.6. «3М™ Petrifilm™ Enterobacteriaceae Count Plate (EB)» – для выявления и определения количества энтеробактерий

15.1.1.7. «3М™ Petrifilm™ Staph Express Count Plate (STX)» + «3М Petrifilm Staph Express Disk» – для выявления и определения количества стафилококков (S.aureus).

15.1.1.2.     Метод отбора смывов

15.1.1.2.1.  Стерильный тампон увлажняют в пробирке с 1 мл стерильного физиологического раствора.

15.1.1.2.2.  Исследуемую поверхность тщательно протирают тампоном три раза в разных направлениях.

15.1.1.2.3.  После взятия смыва тампон опускают в пробирку.

15.1.1.3.     Подготовка петрифильмов к испытанию по п. 9

15.1.1.4.     Подготовка смывов к испытанию

15.1.1.4.1.  Пробирки с тампонами тщательно встряхивают или перемешивают в вортексе в течение 10 секунд.

15.1.1.4.2.  Отжимают смывную жидкость из тампона, надавливая тампоном на стенки пробирки, одновременно вращая тампон.

15.1.1.5. Порядок проведения испытания

15.1.1.5.1. Петрифильм помещают на ровную поверхность. Приподнимают верхнюю пленку.

15.1.1.5.2. Вносят (1,0±0,1) см³ смывной жидкости из пробирки (п.15.1.1.4.2) на поверхность подложки в центр петрифильма. Аккуратно опускают верхнюю пленку петрифильма, избегая захвата пузырьков воздуха.

15.1.1.5.3. Помещают пластиковый распределитель в центр петрифильма плоской стороной вниз (кроме петрифильмов (АС) и (YM), для них – выемкой вниз). Мягко надавливают на центр распределителя для равномерного распределения образца. Не следует перемещать или крутить распределитель по петрифильму!

15.1.1.5.4. Убирают распределитель и оставляют петрифильм на 1-2 минуты для затвердевания геля.

15.1.1.5.5. Посевы инкубируют в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх при повышенной влажности при температуре и времени оптимальном для культивирования определяемого вида микроорганизма и типа используемого петрифильма. Температура и время культивирования определяемых микроорганизмов указаны в соответствующих пунктах настоящих рекомендаций.

15.1.1.6. Обработка результатов

15.1.1.6.1. После инкубирования посевов по п.15.1.1.5.5 подсчитывают количество характерно окрашенных колоний визуально или с помощью Петрифильм-Ридера (3М™ Petrifilm™ Plate Reader).

15.1.1.6.2. Подсчет количества выросших колоний и обработка результатов указаны в соответствующих пунктах настоящих рекомендаций, в соответствии с определяемым видом микроорганизмов и типа используемого петрифильма.

15.1.1.6.3. Результат контроля записывают КОЕ на исследуемую площадь.

15.1.1.6.4. При необходимости колонии могут быть изолированы для дальнейшей идентификации согласно НД на определяемый вид микроорганизма.

15.2.1. Используемые петрифильмы:

15.2.1.1. «3М™ Petrifilm™  Aerobic Count Plate (АС)» – для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ)

15.2.1.2. «3М™ Petrifilm™  Yeast and Mold Count Plate (YM)» – для определения количества дрожжей и плесневых грибов

15.2.1.3. «3М™ Petrifilm™  Petrifilm Coliform Count Plate (СС)» – для выявления и определения количества колиформных бактерий (БГКП)

15.2.1.4. «3М™ Petrifilm™ E.coli/Coliform Count (ЕС)» – для выявления и определения количества E.coli и колиформных бактерий (БГКП)

15.2.1.5. «3М™ Petrifilm™ Enterobacteriaceae Count Plate (EB)» – для выявления и определения количества энтеробактерий

15.2.1.6. «3М™ Petrifilm™ Staph Express Count Plate (STX)» + «3М™ Petrifilm™ Staph Express Disk» – для выявления и определения количества стафилококков (S.aureus)

15.2.2. Подготовка петрифильмов к испытанию по п. 9

15.2.2.1. Дополнительно для исследования петрифильмы активируют.

15.2.2.2. Приподнимают верхнюю пленку петрифильма.

15.2.2.3. Добавляют 1 мл стерильной дистиллированной воды на поверхность подложки в центр петрифильма. Аккуратно опускают верхнюю пленку петрифильма на образец, избегая захвата пузырьков воздуха.

15.2.2.4. Помещают пластиковый распределитель (для соответствующей марки петрифильма) в центр петрифильма. Мягко надавливают на центр распределителя для равномерного распределения воды. Не следует перемещать или крутить распределитель по петрифильму!

15.2.2.5. Убирают распределитель и оставляют петрифильм минимум на 1 час для затвердевания геля. Теперь петрифильмы можно использовать для контроля воздуха помещений. Активированные петрифильмы можно хранить до 7 дней в закрытых пластиковых пакетах в отсутствие света при температуре (2-8)^оС;

15.2.3. Методы отбора

15.2.3.1. Верхнюю пленку активированного петрифильма прикрепить клейкой лентой с внешней стороны к горизонтальной или вертикальной поверхности.

15.2.3.2. Время контроля воздуха составляет не более 15 минут.

15.2.4. Порядок проведения испытания

15.2.4.1. Помещают петрифильм на ровную поверхность.

15.2.4.2. Опускают верхнюю пленку петрифильма на подложку петрифильма.

15.2.4.3. Посевы инкубируют в горизонтальном положении прозрачной стороной вверх при повышенной влажности при температуре оптимальной для культивирования определяемого вида микроорганизмов и типа используемого петрифильма.

Температура и время культивирования определяемых микроорганизмов указаны в соответствующих пунктах настоящих методических рекомендаций. 

15.2.5. Обработка результатов

15.2.5.1. После инкубирования посевов по п.15.2.4.3 подсчитывают количество характерно окрашенных колоний для определяемого вида микроорганизмов визуально или с помощью Петрифильм-Ридера (3М™ Petrifilm™ Plate Reader).

15.2.5.2. Подсчет количества выросших колоний и обработка результатов указаны в соответствующих пунктах настоящих рекомендаций в соответствии с определяемым видом микроорганизма и типа используемого петрифильма.

15.2.5.3. Результат контроля воздуха помещений, полученный на петрифильмах 15.2.1.1 записывают как КОЕ/20 см²петрифильма.

15.2.5.4. Результат контроля воздуха помещений, полученный на петрифильмах 15.2.1.2, записывают как КОЕ/30 см²петрифильма.

15.2.5.5. Результат контроля воздуха помещений, полученный на петрифильмах 15.2.1.1.6, записывают как КОЕ/30 см²петрифильма.